Protective roles of free avian respiratory macrophages in captive birds

In the mammalian lung, respiratory macrophages provide front line defense against invading pathogens and particulate matter. In birds, respiratory macrophages are known as free avian respiratory macrophages (FARM) and a dearth of the cells in the avian lung has been purported to foreordain a weak first line of pulmonary defense, a condition associated with high mortality of domestic birds occasioned by respiratory inflictions. Avian pulmonary mechanisms including a three tiered aerodynamic filtration system, tight epithelial junctions and an efficient mucociliary escalator system have been known to supplement FARM protective roles. Current studies, however, report FARM to exhibit an exceptionally efficient phagocytic capacity and are effective in elimination of invading pathogens. In this review, we also report on effects of selective synthetic peroxisome proliferator activated receptor gamma (PPAR γ) agonists on non phlogistic phagocytic properties in the FARM. To develop effective therapeutic interventions targeting FARM in treatment and management of respiratory disease conditions in the poultry, further studies are required to fully understand the role of FARM in innate and adaptive immune responses.

Efecto inmunomodulador de la ozonoterapia en niños con deficiencia en la inmunidad mediada por fagocitos / Immunomodulator effect of ozone therapy in children with deficiency in immunity mediated by phagocytes

Se realizó un estudio pre-experimental antes después, con la finalidad de evaluar el efecto inmunomodulador de la ozonoterapia en niños con inmunodeficiencia por defectos en la inmunidad mediada por fagocitos. El universo estuvo constituido por un total de 18 niños con deficiencias en la fagocitosis, asistidos en la consulta de Inmunología en el periodo desde septiembre de 2009 hasta junio de 2010, que cumplieron con los criterios de inclusión y exclusión. El ozono se aplicó en dosis escalonadas por insuflación rectal hasta una concentración de 40µg/mL, durante tres meses. Las variables fueron evaluadas 1 mes después del tratamiento. Se determinó si existen diferencias significativas entre las determinaciones antes y después de la ozonoterapia, mediante la prueba T de comparación de medias para muestras dependientes, con un nivel de significación α=0.05. Hubo aumentos significativos del conteo absoluto de neutrófilos en el 100 por ciento de los casos y en el 94 por ciento mejoró significativamente la función fagocítica leucocitaria después de recibir la ozonoterapia. El estado clínico, cualitativamente evaluado, fue satisfactorio en los niños tratados con Ozono y no se reportaron reacciones adversas durante el tratamiento. Se sugiere este proceder terapéutico como alternativa terapéutica inmunoestimulante en la deficiencia fagocítica.

A pre-experimental study was conducted before then, in order to assess the effect of immunomodulator of ozone therapy in children with immunodeficiency defects of phagocyte-mediated immunity. The universe was made up by a total of 18 children with deficiencies in phagocytosis, assisted in the Immunology consultation from September 2009 until June 2010 that met the inclusion and exclusion criteria. Ozone was applied in doses by rectal insufflation stepped up a 40µg/mL concentration, for three months. The variables were assessed 1 month after treatment. It was determined if there are significant differences between determinations before and after of ozone therapy, through T of means comparison test for dependent samples, with a significance level α = 0. 05. There were significant increases in the absolute neutrophil count in 100 percent of cases and the Leukocyte Phagocytic function significantly improved in a 94 percent after receiving ozone therapy. The clinical state, qualitatively evaluated, was satisfactory in children treated with ozone and no adverse reactions were reported during treatment. It is suggested this therapeutic approach as immunostimulant therapeutic alternative in the phagocytic deficiency.

B-1 cell: the precursor of a novel mononuclear phagocyte with immuno-regulatory properties

Characterization of the origin, properties, functions and fate of cells is a fundamental task for the understanding of physiological and pathological phenomena. Despite the bulk of knowledge concerning the diverse characteristics of mammalian cells, some of them, such as B-1 cells, are still poorly understood. Here we report the results obtained in our laboratory on these cells in the last 10 years. After showing that B-1 cells could be cultured and amplified in vitro, a series of experiments were performed with these cells. They showed that B1 cells reside mostly in the peritoneal and pleural cavities, migrate to distant inflammatory foci, coalesce to form giant cells and participate in granuloma formation, both in vitro and in vivo. They are also able to present antigens to immunologically responsive cells and are endowed with regulatory properties. Further, we have also shown that these cells facilitate different types of infection as well as tumor growth and spreading. These data are presently reviewed pointing to a pivotal role that these cells may play in innate and acquired immunity.

A caracterização da origem, propriedades, funções e destino das células representam objetivo fundamental para a compreensão dos fenômenos fisiológicos e patológicos. Apesar da grande quantidade de conhecimentos relativos às diversas características das células de mamíferos, muitas delas, inclusive células B-1, são pouco entendidas. Depois de mostrar que as células B-1 podem ser cultivadas e amplificadas in vitro, uma série de experimentos visando esclarecer as propriedades dessas células puderam ser feitos em nosso laboratório nos últimos 10 anos. Assim, pudemos demonstrar que células B-1 residem principalmente nas cavidades peritoneal e pleural do camundongo, migram para focos inflamatórios distantes, coalescem para formar células gigantes e participam na formação de granulomas, tanto in vitro como in vivo. São também capazes de apresentar antígenos a células responsivas e são dotadas de propriedades imuno-regulatórias. Mostramos ainda que estas células favorecem diferentes tipos de infecções bem como o crescimento e metastatização tumoral. Esses resultados sugerem que células B-1 devem exercer papel central na imunidade como um todo.

Fagócitos mononucleares inflamatórios potencialmente envolvidos no transporte de leishmania em hospedeiros vertebrados / Fagócitos mononuclear potentially inflammatory involved in the transport of leishmaniasis in vertebrate hosts

A infecção por protozoários do gênero Leishmania modula a função de integrinas em fagócitos inflamatórios. Essa alteração pode interferir na migração celular e apresentação de antígenos ao sistema imune. O objetivo deste estudo é identificar populações de fagócitos mononuc1eares inflamatórios potencialmente envolvidos no transporte de Leishmania em hospedeiros vertebrados. Inicialmente, definimos um modelo que permite o estudo do processo de migração em um grande número de fagócitos mononucleares inflamatórios. Para isso, foi induzida peritonite em camundongos da linhagem BALB / c com a injeção de Tioglicolato e foram examinadas a cinética de migração celular para o linfonodo regional e as populações de fagócitos mononuc1eares que compõem o exsudato e sua susceptibilidade à infecção com Leishmania. O influxo celular para o peritônio foi crescente, atingindo o pico de peritonite por volta do quarto dia. A partir de então, o número de células diminuiu, atingindo um platô por volta dos quarenta dias, permanecendo estável até o centésimo dia. Inicialmente, entre 4 horas e o primeiro dia, houve aumento de polimorfonuc1eares (9+ - 4 por cento, - 12+ - 8 por cento das células), seguindo um predomínio de fagócitos mononuc1eares (primeiro ao quarto dia) e posterior aparecimento de linfócitos (quadragésimo ao centésimo dia). A migração de fagócitos mononuc1eares para os linfonodos regionais foi observada 8 horas após o estímulo inflamatório, tornando-se máxima a partir do quarto dia. A migração das células foi confirmada em ensaios de injeção e rastreamento de células marcadas, observando-se a substancial migração dessas células para o linfonodo em um período de doze-vinte e quatro horas...

Adesão de fagócitos monucleares ao conjuntivo na leishmaniose: papel de integrinas Beta sub 1, e receptores de quimiocinas / Monocuclear phagocyte-connective tissue adhesion in leishmaniasis: role of Beta sub 1-integrin and chemokine receptors

Parasitos do gênero Leishmania podem causar lesões na pele, mucosas ou vísceras. Os mecanismos que regulam o tropismo do parasito não estão bem esclarecidos, mas moléculas na superfície de fagócitos infectados podem ter um papel importante. Nosso grupo demonstrou anteriormente que a infecção por Leishmania reduz a adesão de fagócitos mononucleares ao tecido conjuntivo inflamado. Uma vez que a perda de adesão ao tecido conjuntivo é o primeiro passo para a migração celular, este fenômeno pode estar relacionado com a habilidade destas células em deixar o tecido inflamado em direção ao linfonodo drenante. Nesta dissertação, nós examinamos o papel de moléculas de adesão e de receptores de quimiocinas na perda de adesão de fagócitos mononucleares ao tecido conjuntivo inflamado. Para isso nós empregamos análises de citometria de fluxo de moléculas de adesão em fagócitos infectados com Leishmania marcada com fluorocromo. Além disso, realizamos ensaios de adesão celular e análise de expressão de RNAm para receptores de quimiocinas através de RT-PCR em tempo real. Nós observamos que a porcentagem de células infectadas (r=-0,826; P=0,003) e o número de parasitos por célula infectada (r=-0,917; P=0,028) se correlacionaram negativamente com a adesão ao tecido conjuntivo. A redução na adesão celular induzida pela infecção por Leishmania (58,7 à 75,0%; P=0,005) ocorreu tão cedo quanto duas horas após a infecção e foi mantida por pelo menos 24 horas. A infecção com apenas 0,6 parasito por célula reduziu a adesão em 27,9 a 44,6% (P<0,00l). O bloqueio na adesão celular foi mantido pela infecção por Leishmania, mas pela fagocitose de parasitos mortos (adesão celular variou de 15,2% abaixo a 24.0% acima do controle; P>0,05). A infecção por Leishmania também reduziu a adesão celular a fibronectina (54,1 a 96,2%, P<0,0l), colágeno (15,7 à 83,7%, P<0,05) ou laminina (59,1 à 82,2%, P<0,05). Não houve modulação da expressão de VLA4, VLA5, LFA-1, Mac-1, L-Selectina,...

Influência da ooforectomia e da gravidez na função fagocitária do sistema mononuclear fagocitário em modelo experimental / The influence of oophorectomy and pregnancy on the phagocytic function of the phagocytic mononuclear system in experimental model

INTRODUÇAO: A interação dos hormônios ovarianos e placentários com o sistema imune ainda é controversa na literatura. OBJETIVOS: Determinar a influência da ooforectomia e da gravidez na atividade fagocitária do sistema mononuclear fagocitário (SMF) em modelo experimental. MATERIAL E MÉTODO: Foram utilizadas 45 ratas wistar adultas divididas em três grupos (n = 15): grupo 1 - controle; grupo 2 - ratas ooforectomizadas; grupo 3 - ratas grávidas. A função do sistema mononuclear fagocitário foi determinada pela captação de enxofre coloidal marcado com 99mTc pelos órgãos do SMF, além de avaliar a quantidade de radiofármaco remanescente na circulação sangüínea por meio de um coágulo sangüíneo. O peso e a radiação de cada amostra foram medidos e comparados pelo teste t de Student. Realizou-se também análise histológica desses órgãos. RESULTADOS: Em todos os animais, a captação do radiofármaco foi maior no fígado, seguido por baço e pulmão. O coágulo sangüíneo apresentou uma quantidade mínima de radiação. A ooforectomia não foi acompanhada de mudanças na captação do colóide. Entretanto as ratas grávidas registraram menor captação do colóide no fígado e maior captação no pulmão. Não houve alteração na histoarquitetura dos órgãos estudados. CONCLUSÕES: Conclui-se que a gravidez altera a atividade fagocitária do SMF, porém a ooforectomia não parece interferir nessa função.

Defense reactions of Dermatobia hominis (Diptera: Cuterebridae) larval hemocytes

The defense reactions against biological (Histoplasma capsulatum and Escherichia coli) and non-biological materials (China ink and nylon thread) were tested in vivo in third instar larvae of Dermatobia hominis. The cellular defense performed by larval hemocytes was observed under electron microscopy. China ink particles were phagocytosed by granular cells 5 h after injection. E. coli cells were internalized by granular cells as early as 5 min after injection and totally cleared 180 min post-injection, when many hemocytes appeared disintegrated and others in process of recovering. H. capsulatum yeasts provoked, 24 h after being injected, the beginning of nodule formation. Nylon thread was encapsulated 24 h after the introduction into the hemocoel. Our results suggest that granular cells were the phagocytic cells and also the responsible for the triggering of nodule and capsule formation. In the presence of yeasts cells and nylon thread, they released their granules that chemotactically attracted the plasmatocytes that on their turn, flattened to surround and isolate the foreign material.

Los microbios y el hombre, ¿enemigos o amigos? / Microorganisms and man: enemies or friends?

Todos los microorganismos (bacterias, parásitos, hongos y virus) han constituido desde siempre un panel de agresores para el hombre, siendo responsables directos o indirectos de múltiples patologías de origen infeccioso que se desarrollan enfrentando a los mecanismos de la inmunidad. El presente artículo se divide en dos partes: la primera constituye una resumida actualización de los eventos inmunes y la segunda una discusión de la relación microbios-hombre en términos evolutivos replanteando desde esa óptica el clásico antagonismo. En ese sentido, un dinámico equilibrio entre ambos, puede ser alternativamente alterado por uno de los responsables con una consecuente compensación a cargo de la contraparte. Así, tomando como referencia el permanente cambio en las estrategias de evasión microbiana, puede especularse que los mecanismos inespecíficos junto a las barreras naturales pueden haber sido la defensa ancestral del hombre. Más adelante la inflamación inicial puede haber sido mejorada mediante la generación de moléculas activadoras del complemento. Posteriormente, las moléculas de histocompatibilidad y los receptores antigénicos de los linfocitos B y de los linfocitos T pueden haber sido generadas para montar los eventos específicos que hoy se conocen. La participación de células fundamentales y accesorias en forma conjunta ha hecho necesaria la expresión de moléculas de adhesión y la generación y ampliación del espectro de citoquinas y sus receptores. La producción de anticuerpos puede haber inducido el mejoramiento efector de sistemas moleculares como el complemento y así juntos, eficientizar la primitiva fagocitosis. La evolución del linaje T puede haber sido más compleja, habida cuenta que debieron generarse subpoblaciones o sets citotóxicos por un lado y orquestadores y reguladores por otro. Por otra parte la diversidad de reconocimiento que se hizo necesaria a nivel de los receptores específicos se desarrolló con un gasto mínimo de información genética, pero posibilitó la aparición de fenómenos no deseados con participación de efectores inmunes, lo que impuso la aparición de críticos mecanismos reguladores donde participan sinérgicamente todos los sistemas biológicos...

Expressão dos receptores FC de imunoglobulina A em fagócitos do sangue de pacientes com bacteremia / Expression of immunoglobulin a FC receptors on blood phagocytes of patients with gram-negative bacteremia

Expressão aumentada do receptor Fc de IgA (CD89) e da cadeia g associada, avaliadas respectivamente por citometria de fluxo e por “immunobloting”, foram encontradas em fagócitos do sangue de pacientes com bacteremia por germes gram-negativos, em comparação com controles e pacientes com bacteremia por gram-positivos. A Mr do CD89 avaliada por SDS-PAGE estava diminuída, com núcleo protéico de 32kDa, sugerindo alteração de glicosilação. O aumento da expressão do CD89 correlacionou-se com aumento dos níveis séricos de IL-6. A cadeia g estava fosforilada nos neutrófilos, sugerindo participação do CD89 na sepsis por gram-negativos.

The expression and function of FcaRI (CD89) were analyzed on blood monocytes and neutrophils of patients with gram-positive and gram-negative bacteremia. Eighteen patients with gram-positive bacteremia, sixteen patients with gram-negative bacteremia and twenty healthy individuals were studied. CD89 expression were analyzed by flow cytometry using specific stained antibodies. Analysis of the surface iodinated CD89 molecules by SDS-PAGE and of the CD89 g-associated chain by immunoblotting also were performed. A marked increase in expression of the a and g subunits of the FcaRI were found on both types of cells in patients with gram-negative bacteremia, but not in patients with gram-positive bacteremia. This increase was independent of serum IgA levels. FcaRI Mr was lower on cells from gram negative patients than on cells from controls (50-65 kDa vs 55-75 kDa) despite of similar 32 kDa backbone, indicating altered glycosylation. Increased levels of FcaRI on blood phagocytes correlated with enhanced serum IL-6 levels, but not with IFN-g or TNF-a levels. The CD89 g-associated chain was phosphorylated on neutrophils, suggesting an engagement of CD89 during gram negative sepsis.

Inmunosenescencia / Immunosenescence

Se presenta un breve revisión bibliográfica referente a distintos aspectos del proceso de inmunosenescencia, con sus efectos sobre diversos componentes del Sistema Inmune, incluyendo linfocitos, tanto T como B, y mecanismos de defensa inespecífica, como fagocitos. Finalmente, se presenta una breve reseña sobre las consecuencias clínicas de este proceso evolutivo

Células y órganos del sistema inmune / Cells and organs of the immune system

Las células del sistema inmune que incluyen linfocitos, granulocitos y monocitos-macrófagos, se forman en la médula ósea a partir de células pluripotentes, a través de un proceso finamente regulado y el que participan varias citoquinas. Los granulocitos (neutrófilos, eosinófilos y basófilos) presentan particularidades morfológicas y funcionales. La principal función de los neutrófilos es su capacidad fagocítica. En el capítulo se explican los procesos de activación, quimiotaxis, fagocitosis y bacteriolisis. Las células del sistema fagocítico mononuclear (monocitos y macrófagos) tienen como función fagocitar; actividad más desarrollada en los macrófagos, que son células tisulares derivadas de los monocitos circulantes. Los linfocitos son las células que participan en la inmunidad adquirida o específica. Las células T participan en la inmunidad celular y las células B en la inmunidad humoral. Una tercera subpoblación de linfocitos, las células NK, participan en la inmunidad celular de tipo innata. Los órganos linfoides se pueden clasificar en primarios (timo y médula ósea) y secundarios (bazo, ganglios linfáticos y tejido linfoide asociado a mucosas). En el timo maduran los LT y en la médula ósea los LB. En los órganos linfoides secundarios los linfocitos y otras células del sistema inmune toman contacto con los antígenos y es en ellos donde se genera la respuesta inmune específica. En estos órganos existen zonas ricas en células T, y otras en que, principalmente, existen células B. La capacidad de los linfocitos de recircular entre los órganos linfoides secundarios, vasos linfáticos, conducto torácico y vasos sanguíneos le permiten tomar contacto con antígenos en diferentes lugares del organismo

Actividad fagocítica de polimorfonucleares en pacientes con hipersensibilidad a la aspirina, asma y pólipos nasales / Phagocytic function in patients with aspirine sensitive asthma and hypertrophy rhinosinusitis with nasal polyps

La eficiencia de la función fagocítica depende de la óptima actividad de cada estadio del proceso fagocítico. Los pacientes con hipersensibilidad a la aspirina, asma, rinosinusitis hipertrófica con pólipos nasales ®triada de la aspirina¼ (pacientes ASA) tienen indicios de defectos en la fagocitosis. Se estudiaron 34 pacientes ASA y 34 sujetos sanos. Las células polimorfonucleares, quimioluminiscencia (CL) de los pacientes ASA se estudiaron in vitro. La actividad fagocítica se midió con la técnica de quimioluminiscencia. No se encontraron diferencias estadísticas con la prueba de U de Mann Whitney (p=NS). No hubo diferencias en la capacidad fagocítica de polimorfonucleares de pacientes ASA y controles sanos. A pesar de los avances de las ciencias básicas, la causa y patogenesis de los pólipos nasales no se ha aclarado, particularmente la tinosinusitis, asma intrínseca y la intolerancia a farmacos no esteroides

Evaluación de la actividad fagocitaria y bactericida de los monocitos y heterófilos aviares contra Samonella gallinarum / Evaluation of phagocytic and bactericidal activities of avian monocytes and heterophils against Salmonella gallinarum in vitro

Se determinó, mediante ensayos in vitro, la capacidad fagocítica y bactericida de los deterófilos y de los monocitos aviares contra Salmonella gallinarum, en presencia y en ausencia de 10 por ciento de suero hiperinmune. En los ensayos de fagocitosis se observó que los hetrófilos fagocitaron al 28 ñ 4.7 por ciento de las bacterias sin opsonizar y al 45 ñ 9.9 por ciento de las bacterias opsonizadas, obteniéndose diferencias significativas (P< 0.05). En contraste, los monocitos sólo fagocitaron un 10.3 ñ 4.2 por ciento y un 11.7 ñ 3.8 por ciento de bacterias opsonizadas y sin opsonizar respectivamente (P> 0.05). En los ensayos bactericidas se observó que los heterófilos destruyeron al 90.46 ñ 3.3 por ciento de la bacteria sin opsonizar y 90 ñ 2.3 por ciento de la bacteria opsonizada (P> 0.05); sin embargo, en los monocitos se obtuvo un 10.5 ñ 6.6 por ciento y un 84.74 ñ 5 por ciento respectivamante, obteniéndose diferencias significativas (P< 0.05). Los resultados del presente estudio indican que la fagocitosis de los heterófilos fue significativamente incrementada por la opsonización; en el caso de los monocitos, no hubo un efecto significativamente mayor. Aproximadamente el 90 por ciento de las bacterias fagocitadas por los heterófilos fueron destruidos, como se determinó en el ensayo. La opsonización no incrementó significativamante el porcentaje de bacteria destruida por parte de los heterófilos, sin embargo, la psonización de Salmonella gallinarum sí favoreció la capacidad bactericida de los monocitos

Actividad inmunoadyuvante del Staphylococcus aureus: efecto sobre la respuesta humoral y el sistema fagocítico mononuclear en ratas / Inmunoadyuvant activity of staphylococcus aureus:effect on humoral response and mononuclear phagocytic system in rats

Se estudió el efecto del S. aureus y de varios tipos celulares sobre: a) producción de anticuerpos (hemaglutininas) y b) estimulación del Sistema Fagocítico Mononuclear (S.F.M.). Ratas adultas, endocriadas,recibieron:I) células de exudado peritoneal (CEP); II) células del bazo (CB); III) células de bazo no-adherentes (CBN-A); IV) células de exudado peritoneal normal (CEPN); V) células de bazo normal (CBN); VI) células de bazo normal no-adherentes (CBN N-A); VII) S. aureas s.c. y VIII) (-). I, II y III proveían de ratas inoculadas 7 días antes con S. aureus y IV,V y VI de animales normales. Se sensibilizó con glóbulos rojos de carnero al 50 por ciento. Se determinó el título de hemaglutininas séricas totales y con 2 mercapto etanol en la Respuesta primaria y en la Respuesta secundaria, posterior al segundo inóculo. Se estimó peso y se practicó un estudio anatomopatológico del hígado y bazo de los animales tratados con S. aureus y testigos. Se hallaron diferencias significativas en el título de hemaglutininas en todos los días estudiados (Respuesta primaria y secundaria)-p<0,0l;p<0,05-entre los grupos I,II,III,VII vs. IV,V,VI y VIII. Se pesó el hígado y bazo (corregido/peso del animal) en ratas inoculadas con S. aureus (1) y sin tratamiento o control (2). Los valores fueron significativamente mayores en (1) (p<0,001). Hígado: a) 5,746 Ð 0,67; b) 3,609 Ð 0,456. Bazo: a)0,5698 Ð 0,067; b) 0,325 Ð 0,05. Las modificaciones anatomopatológicas en hígado y bazo se observaron con mayor frecuencia e intensidad en los animales tratados que en los testigos (p<0,01). Se confirma el efecto adyuvante del S. aureus, ya que produce aumento de peso e importantes modificaciones anatomopatológicas del órganos del S.F.M., eleva la respuesta humoral a un antígeno no relacionado y estimula la memoria inmunológica